wong nai chung gap介紹

请使用支原体染色检测试剂盒检测是否为支原体污染。 支原体染色检测试剂盒可以向碧云天订购。 用抗荧光淬灭封片液封片后荧光显微镜下观察。 染色效果可参见图1。 极少数细胞凋亡时没有DNA断裂，此时不适用TUNEL法检测。 wong nai chung gap 在个别类型的坏死细胞中也发现TUNEL检测呈阳性。 在需要严格判断细胞凋亡的情况下，最好同时检测多个凋亡指标。 TUNEL反应过强。

本试剂盒有如下优点。 高灵敏度：背景染色极低，阳性染色明亮，可以在单细胞水平检测到细胞凋亡，同时由于凋亡早期就有DNA断裂，可以检测到早期的细胞凋亡。 wong nai chung gap 特异性：TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞，而不容易标记坏死细胞。

wong nai chung gap: 试剂

TUNEL检测反应时间过长，或TUNEL检测反应过程中反应液渗漏，细胞或组织表面不能保持湿润，也可能出现非特异性荧光。 注意控制反应时间，并确保TUNEL检测反应液能很好地覆盖样品。 有些细胞或组织，例如平滑肌细胞或组织，nuclease或polymerase的酶活性水平较高，易导致出现非特异性的荧光标记。 解决方法是，取细胞或组织后立即固定并且要充分固定，以阻止这些酶导致假阳性。

快速：仅需约1-2个小时即可完成。 方便：只需一步染色反应，洗涤后即可观察，不必使用二抗等进行多步操作。 应用范围广：可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况，也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。 实测效果好：参考图1，本试剂盒的实际检测效果和国外同类产品相当。

wong nai chung gap: 细胞相关

图1. 本产品的检测效果以及和Roche公司同类产品检测效果的比较。 碧云天的本试剂盒和Roche公司同类试剂盒分别检测正常HeLa细胞和经DNase I处理的HeLa细胞的效果图，图中的绿色荧光为TUNEL染色阳性细胞。 碧云天的本试剂盒和Roche公司同类试剂盒分别检测正常HeLa细胞和经10μM喜树碱处理24小时的HeLa细胞的效果图。 wong nai chung gap 无论是经DNase I处理的阳性细胞样品，还是使用10μM喜树碱处理的阳性细胞样品，碧云天的本试剂盒和Roche公司的同类试剂盒的效果相当。

• 染色效果可参见图1。
• 为防止细胞聚集成团，宜在侧摆摇床或水平摇床上缓慢摇动的同时进行固定。
• 可以用试剂盒提供的TdT酶稀释液稀释TdT酶2-5倍后再按照说明书操作。
• 高灵敏度：背景染色极低，阳性染色明亮，可以在单细胞水平检测到细胞凋亡，同时由于凋亡早期就有DNA断裂，可以检测到早期的细胞凋亡。
• 加入含碧云天生产的免疫染色强力通透液或含0.5% Triton X-100的PBS，室温孵育5分钟。

加入碧云天生产的免疫染色强力通透液 或含0.3% Triton X-100的PBS，室温孵育5分钟。 此时可以用流式细胞仪进行检测或涂片后在荧光显微镜下观察。 可以使用的激发波长范围为 nm，发射波长范围为 nm(绿色荧光)。 碘化丙啶双染时，如果碘化丙啶染色过深会导致观察到的本试剂盒的TUNEL染色效果减弱。 碘化丙啶可以接受fluorescein激发产生的荧光，从而起到淬灭作用。 解决方法是用较低浓度的碘化丙啶染色，例如0.5μg/ml碘化丙啶。 支原体污染。

可以用试剂盒提供的TdT酶稀释液稀释TdT酶2-5倍后再按照说明书操作。 稀释后的TdT酶需当日使用。 参考下表配制适当量的TUNEL检测液，需充分混匀。 注意：配制好的TUNEL检测液必须一次使用完毕，不能冻存。 wong nai chung gap TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂，但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。

这样一方面可以把凋亡和坏死区分开，另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

wong nai chung gap: 试剂

加入含碧云天生产的免疫染色强力通透液或含0.5% Triton X-100的PBS，室温孵育5分钟。 用碧云天生产的免疫染色固定液或4%多聚甲醛固定细胞30分钟。 为防止细胞聚集成团，宜在侧摆摇床或水平摇床上缓慢摇动的同时进行固定。

本图中的染色实验均在12孔板中进行。 本图仅作参考，不同的样品不同的检测条件，实际获得的结果可能有较明显的差别。 碧云天生产的一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒为您提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。 对于经过固定和洗涤的细胞或组织，只要经过一步染色反应，洗涤后就可以通过荧光显微镜或流式细胞仪检测到呈现绿色荧光的凋亡细胞。 细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。 wong nai chung gap 细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现 bp的DNA ladder。 如果没有适合的离心机，请注意操作轻缓，防止发生凋亡的细胞在洗涤时洗去。 后续整个操作也需要轻缓。 用碧云天生产的免疫染色强力通透液或含0.3% Triton X-100的PBS重悬细胞，室温孵育5分钟。